L-3000四元低壓自動進樣高效液相色譜用于研究蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)動力學和構(gòu)型變化,可更好地確定它們的高級結(jié)構(gòu)。氘是氫的一種重同位素,因此可以通過質(zhì)譜對氘含量進行測量或“稱重”。
科學家們使用HDX-MS研究獲得的信息對不同“狀態(tài)”的蛋白質(zhì)高級結(jié)構(gòu)進行對比,如對比與候選藥物結(jié)合前和與結(jié)合后的構(gòu)型變化,定位藥物結(jié)合部位和結(jié)合的強弱。通過計算和比較氘交換水平的差別來獲得蛋白質(zhì)構(gòu)型變化的信息。HDX-MS能夠在溶液中監(jiān)測蛋白結(jié)合域相互作用情況、蛋白質(zhì)結(jié)合動力學、配體結(jié)合以及蛋白質(zhì)折疊等相關(guān)研究。
HDX-MS研究需要對蛋白質(zhì)構(gòu)型的微小變化進行檢測,高效率的色譜分離對達到高品質(zhì)的數(shù)據(jù)結(jié)果至關(guān)重要。ACQUITY UPLC M-Class系統(tǒng)更高的耐壓確保了能夠在0℃對酶切肽段快速進行LC分離和質(zhì)譜檢測。全自動HDX-MS系統(tǒng)整合了HDX-MS的所有步驟,包括全自動的氫氘交換樣品制備過程、蛋白質(zhì)序列確定、氘交換曲線以及沃特世*的DyanmX HDX數(shù)據(jù)分析軟件。
同時發(fā)布的還有沃特世專門開發(fā)的用于用于蛋白質(zhì)“在線酶切”的UPLC色譜柱,即Waters Enzymate BEH在線Pepsin酶切柱,將HDX-MS效果提升到一個新高度。ACQUITY UPLC M-Class系統(tǒng)與Waters SYNAPT G2-Si或Xevo G2-S QTof質(zhì)譜儀聯(lián)用,提供高質(zhì)量的圖譜和數(shù)據(jù),得到HDX-MS分析所需要的微小質(zhì)量變化。將所有這些創(chuàng)新技術(shù)組合在一起,沃特世提供了完整的且*的HDX-MS分析平臺。
L-3000四元低壓自動進樣高效液相色譜
對于復雜樣品,特別是當樣品中的目標組分如蛋白質(zhì)、肽或小分子的動態(tài)范圍很寬時,二維LC是非常有用的策略。利用此技術(shù)能夠增加色譜峰容量,具體的操作是先通過*維分離對蛋白或肽進行分組,所得到的每一個餾分經(jīng)過富集,再通過具有不同選擇性的第二維色譜柱進行分離。
ACQUITY UPLC M-Class系統(tǒng)采用直觀易用的向?qū)Р藛芜M行方法設置、標準化的色譜柱以及具有高重現(xiàn)性的色譜儀器有效簡化了2D-LC分離。智能化閥操作增加了樣品通量,同時zui大程度地提高數(shù)據(jù)質(zhì)量。
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